Margaret Osborne s-a născut într-o fermă din Joseph , Oregon , în 1918 . La vârsta de nouă ani, familia sa s-a mutat în Spokane , statul Washington , unde Margaret a intrat prima dată în contact cu tenisul. Doi ani mai târziu, familia s-a mutat la San Francisco . Acolo Margaret a jucat pe facilitatea de tenis din Golden Gate Park și a scris articole pentru revista American Lawn Tennis . În 1936 a absolvit liceul . Din moment ce părinții ei nu-și puteau finanța studiile universitare, ea a decis să urmeze o carieră de jucător de tenis. În același an a câștigat campionatele americane de tineret la simplu și dublu.
Din 1938 Osborne a fost unul dintre cei mai buni zece jucători de tenis americani. În timpul celui de- al doilea război mondial a lucrat într-un șantier naval. După război, ea a câștigat mai multe simple la campionatele franceze și americane , precum și la campionatele de la Wimbledon . A câștigat campionatele SUA la dublu încă din 1941. Între 1946 și 1957 a fost una dintre cele mai bune zece jucătoare de tenis din lume, din 1947 până în 1950 a fost listată ca fiind cea mai bună jucătoare de tenis din lume. A câștigat ultimul său titlu mixt la Wimbledon în 1962, la vârsta de 44 de ani.
Din 1938 până în 1958, Osborne a participat la Cupa Wightman de zece ori și a reușit să câștige toate jocurile. Echipa americană a câștigat cupa de opt ori.
În 1947, Osborne s-a căsătorit cu bogatul om de afaceri William duPont , descendent al familiei fondatoare a companiei chimice DuPont . Cuplul s-a stabilit la casa familiei Bellevue Hall din Wilmington , Delaware , unde Margaret se putea antrena pe un total de nouă terenuri de tenis și pe toate suprafețele (teren greu, nisip, iarbă). Nu a participat niciodată la campionatele australiene, deoarece soțul ei se temea că vremea australiană nu poate fi tolerată. Căsătoria sa încheiat în divorț în 1964. După ce William a murit un an mai târziu, Margaret Osborne s-a mutat împreună cu singurul ei fiu William la El Paso , Texas , într-o casă cu partenerul ei geamăn Margaret Varner Bloss și s-a dedicat creșterii de cai.